Terapia de edición de ácidos nucleicos para la amiloidosis hereditaria por transtiretina (ATTR)

Tema: Terapia de edición genética basada en CRISPR-Cas9 (NTLA-2001) para tratar la amiloidosis hereditaria por transtiretina mediante la inactivación del gen TTR en los hepatocitos del hígado, con el objetivo de disminuir la producción de la proteína transtiretina que forma depósitos amiloides en nervios y corazón.

Tipo de terapia génica:
In vivo: El tratamiento se administra directamente al paciente mediante una infusión intravenosa. Las nanopartículas lipídicas transportan los componentes del sistema CRISPR hasta el hígado, donde ocurre la edición genética dentro de las células del organismo.

Somática: La modificación genética ocurre en células somáticas del hígado (hepatocitos), por lo que los cambios genéticos no se transmiten a la descendencia.

Dirigido hacia ADN o ARN: La terapia está dirigida hacia el ADN, específicamente hacia el gen TTR presente en el ADN de los hepatocitos. El sistema CRISPR-Cas9 produce un corte en este gen y provoca su inactivación (knockout), lo que disminuye la producción de la proteína transtiretina responsable de la enfermedad.

Dirigido por ADN, ARN, proteínas o vectores:

La edición genética utiliza el sistema CRISPR-Cas9, compuesto por:

• ARN mensajero (mRNA) que codifica la proteína Cas9.
• ARN guía (sgRNA) que dirige el complejo hacia la secuencia específica del gen TTR.
• Nanopartículas lipídicas (LNP) que actúan como vector para transportar el mRNA y el sgRNA hacia los hepatocitos.

Órgano, tejido o células a tratar: El tratamiento está dirigido principalmente a los hepatocitos del hígado, ya que estas células son responsables de producir la mayor parte de la proteína transtiretina en el organismo, y la edición genética en estas células disminuye la producción de TTR circulante.

Resultados a corto, mediano y largo plazo:

A corto plazo (primer mes después del tratamiento):
En los ensayos clínicos iniciales se observó que, durante las primeras semanas después de una sola infusión del tratamiento, los niveles de la proteína transtiretina en sangre disminuyeron rápidamente. Los pacientes presentaron buena tolerancia al tratamiento y los efectos adversos observados fueron principalmente leves.

A mediano plazo (4 a 6 meses):
El seguimiento clínico mostró que la disminución de la proteína responsable de la enfermedad se mantiene durante varios meses después de una sola dosis. Durante este periodo los pacientes continuaron presentando niveles bajos de transtiretina en sangre y no se observaron efectos adversos graves relacionados con la terapia.

A largo plazo (hasta 12 meses de seguimiento):
Los datos de seguimiento indicaron que el efecto del tratamiento puede mantenerse durante un año después de la administración. Esto sugiere que la edición genética realizada en los hepatocitos produce cambios duraderos en el ADN, lo que permite una reducción prolongada de la producción de la proteína transtiretina.

Mecanismo de acción de NTLA-2001.

Imagen obtenida de: https://doi.org/10.1056/NEJMoa2107454

Referencias Bibliográficas:

1. Gillmore JD, Gane E, Taubel J, Kao J, Fontana M, Maitland ML, Seitzer J, O'Connell D, Walsh KR, Wood K, Phillips J, Xu Y, Amaral A, Boyd AP, Cehelsky JE, McKee MD, Schiermeier A, Harari O, Murphy A, Kyratsous CA, Lebwohl D. CRISPR-Cas9 in vivo gene editing for transthyretin amyloidosis. N Engl J Med [Internet]. 2021 [consultado 8 Mar de 2026];385(6):493-502. Disponible en: https://doi.org/10.1056/NEJMoa2107454

2. Intellia Therapeutics, Regeneron Pharmaceuticals. Intellia and Regeneron present updated interim data from phase 1 study of NTLA-2001 for transthyretin amyloidosis [Internet]. 2022 [consultado 8 Mar de 2026]. Disponible en: https://ir.intelliatx.com/news-releases/news-release-details/intellia-and-regeneron-present-updated-interim-data-phase-1

Ejemplo del uso de las células madre mesenquimales (MSCs) derivadas de la médula ósea para osteoartritis de rodilla

Uso de las células madre mesenquimales (MSCs) derivadas de la médula ósea para osteoartritis de rodilla

Tipo de células madre: Se utilizan células madre mesenquimales derivadas de la médula ósea (BM-MSCs), que son células multipotentes con marcada capacidad inmunorreguladora y efecto paracrino. Actúan disminuyendo la inflamación articular, regulando citocinas proinflamatorias y favoreciendo la reparación del tejido cartilaginoso dañado en la osteoartritis de rodilla.

Método de obtención:

1.      Se obtiene un aspirado de médula ósea, generalmente de la cresta ilíaca posterior, bajo anestesia local y condiciones estériles, extrayendo aproximadamente 30–60 mL.

2.      La muestra se somete a centrifugación por gradiente de densidad para separar la fracción mononuclear. Se seleccionan las células adherentes al plástico (propias de las MSCs) y se eliminan las células hematopoyéticas no deseadas.

3.      Las células se cultivan en condiciones controladas durante varias semanas, realizando expansiones sucesivas hasta alcanzar la dosis terapéutica requerida. Se verifica su identidad mediante marcadores inmunofenotípicos característicos (CD73+, CD90+, CD105+ y negativos para marcadores hematopoyéticos).

4.      Antes de su administración se evalúa la viabilidad celular, esterilidad y expresión de marcadores específicos para garantizar seguridad y pureza del producto celular.

5.      Las BM-MSCs se suspenden en una solución fisiológica y se inyectan directamente en la articulación de la rodilla afectada, en algunos casos con guía ecográfica para asegurar su correcta localización intraarticular.

Vía de administración: Es intraarticular (vía parenteral).

Resultados de su uso:

Resultados a corto plazo ( 1 a 3 meses)
En los primeros meses tras la inyección de BM-MSCs se observa una disminución del dolor articular (reducción en la escala VAS), mejoría en la movilidad de la rodilla y mayor facilidad para realizar actividades cotidianas. También comienza la modulación del ambiente inflamatorio intraarticular con disminución de citocinas proinflamatorias como IL-1β y TNF-α.

Resultados a mediano plazo ( 3 a 12 meses)
Los pacientes muestran mejor desempeño en escalas funcionales como WOMAC y KOOS, con menor dolor, menos rigidez y mayor funcionalidad de la rodilla. Los estudios de resonancia magnética indican cambios favorables en el entorno del cartílago y menor progresión del daño degenerativo.

Resultados a largo plazo (12 meses o más)
Los beneficios pueden mantenerse con reducción del dolor y mejor función articular. El tratamiento podría ralentizar la degeneración del cartílago, aunque aún no se confirma una regeneración completa. Además el procedimiento, presenta un perfil de seguridad favorable, con efectos adversos leves y transitorios, como dolor o inflamación local tras la inyección.

Video obtenido de: https://www.youtube.com/watch?v=WknZIwGD-nQ

Referencias bibliográficas:

1. Lee BW, Lee JJ, Jung JY, Ju JH. Intra-articular injection of human bone marrow-derived mesenchymal stem cells in knee osteoarthritis: a randomized, double-blind, controlled trial. Cell Transplant [Internet]. 2025 [consultado 1 Mar 2026];34:9636897241303275. Disponible en: https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC11775978/

2. Wei P, Bao R. Intra-articular mesenchymal stem cell injection for knee osteoarthritis: mechanisms and clinical evidence. Int J Mol Sci [Internet]. 2022 [consultado 1 Mar 2026];24(1):59. Disponible en: https://doi.org/10.3390/ijms24010059

Ejemplo de transgénico animal en la enfermedad de Fibrosis Quística. Ventajas y desventajas de los transgénicos.

Ejemplo de transgénico animal en la enfermedad de Fibrosis Quística.

Tema: Desarrollo y uso de un modelo porcino transgénico con deleción completa del gen CFTR (CFTR-null) para replicar la fisiopatología humana y mecanismos de la Fibrosis Quística.

Objetivo: Generar un modelo animal con mutación nula del CFTR que reproduzca fielmente los defectos pulmonares, pancreáticos, intestinales y demás  manifestaciones multisistémicas de la Fibrosis Quística humana. Para investigar el inicio de la enfermedad, los mecanismos de transporte iónico, el daño orgánico asociado y, además, permitir la evaluación y el desarrollo de terapias dirigidas al defecto del canal CFTR, contribuyendo a una mejor comprensión de su patogenia.

Tipo de Animal Transgénico: El modelo consiste en un Cerdo doméstico (Sus scrofa domestica) homocigoto knockout para el gen CFTR (CFTR-null), sin expresión funcional de la proteína reguladora de la conductancia transmembrana de fibrosis quística.

Método de Obtención:

1. Se aislaron fibroblastos de fetos porcinos a mitad de gestación.

2. Se construyó un vector con secuencias homólogas que flanquean la región de interés del CFTR y un cassette de resistencia, destinado a interrumpir la transcripción normal de CFTR.

3. El vector de targeting se introdujo en los fibroblastos utilizando vectores adeno-asociados (rAAV) que promueven la recombinación homóloga específica y reducen integraciones aleatorias.

4. Luego , se seleccionaron células con integración dirigida mediante cultivo en presencia de un antibiótico y cribado por PCR/Southern blot para confirmar la  interrupción de CFTR.

5.Los fibroblastos con mutación nula del CFTR se usaron como donantes para transferencia nuclear somática (SCNT) en ovocitos porcinos enucleados.

6. Los embriones reconstruidos se implantaron en cerdas receptoras, resultando en el nacimiento de cerditos CFTR-null homocigotos. Tras el nacimiento, los lechones se genotiparon para confirmar la presencia del CFTR alterado; los animales CFTR−/− mostraron manifestaciones fisiológicas y patológicas similares a la fibrosis quística humana, incluyendo alteraciones en el transporte de Cl− y daño pancreático y pulmonar.

 Para que sirve:

• Este modelo reproduce la enfermedad multisistémica humana con defectos en el transporte iónico, meconium ileus, destrucción pancreática, enfermedad hepática y alteraciones de las vías respiratorias, permitiendo estudiar cómo la ausencia de CFTR afecta células y tejidos desde el nacimiento.
• Estudiar la transcriptómica y la función celular en epitelios respiratorios antes del desarrollo de inflamación crónica, utilizando técnicas avanzadas como la secuenciación de célula única en vías aéreas grandes y pequeñas desde el nacimiento.
• Sirve para probar terapias génicas y estrategias de corrección molecular, como vectores virales dirigidos al CFTR, permitiendo medir su efecto sobre el transporte iónico y la función de la barrera mucociliar antes de su aplicación en humanos.
• Facilita la investigación de infecciones secundarias, alteraciones en la bioquímica de las secreciones y trastornos metabólicos en órganos afectados, superando las limitaciones observadas en modelos murinos convencionales.

Cambios estructurales en las vías respiratorias de lechones CFTR−/−.

Imagen obtenida de: https://link.springer.com/article/10.1007/s00424-020-02440-y

5 Ventajas y 5 Desventajas de los transgénicos

Ventajas de los organismos transgénicos

1. Aumento del rendimiento agrícola: Los cultivos transgénicos suelen mostrar mayor productividad por hectárea en comparación con las variedades tradicionales. Esto se logra al reducir pérdidas causadas por plagas, enfermedades y malezas, contribuyendo así a mejorar la seguridad alimentaria global.

2. Reducción en el uso de pesticidas y exposición a químicos: Cultivos resistentes a plagas, como el algodón Bt, permiten disminuir significativamente el uso de pesticidas sintéticos. Esto protege a los agricultores de la exposición a agentes tóxicos y reduce la contaminación ambiental derivada del uso intensivo de químicos.

3. Producción de medicamentos en animales transgénicos: Los animales modificados genéticamente pueden generar proteínas terapéuticas humanas en leche, sangre o huevos (por ejemplo, antitrombina o factores de coagulación), ofreciendo una forma más eficiente de producir fármacos complejos que algunos métodos tradicionales.

4. Modelos para investigación biomédica: Ratones, cerdos y otros animales transgénicos se emplean como modelos de enfermedades humanas, como cáncer, fibrosis quística o patologías neurodegenerativas. Esto facilita el estudio de mecanismos fisiopatológicos y la prueba de nuevos tratamientos con mayor precisión.

5. Mejora de la calidad nutricional: La ingeniería genética permite incrementar niveles de vitaminas o micronutrientes en cultivos básicos. Un ejemplo es el arroz dorado, enriquecido con provitamina A, que ayuda a reducir deficiencias nutricionales en poblaciones vulnerables.

Desventajas de los organismos transgénicos

1.  Riesgos ecológicos y pérdida de biodiversidad: Existe la posibilidad de que genes modificados se transfieran a especies silvestres o cultivos no modificados (flujo génico), lo que podría alterar poblaciones naturales y reducir la diversidad genética local.

2.  Desarrollo de resistencias: El uso continuado de cultivos resistentes a herbicidas o insectos puede favorecer la aparición de malezas o plagas resistentes, obligando al empleo de químicos más potentes o estrategias más intensivas, lo que podría aumentar los impactos negativos.

3.  Bienestar animal: La manipulación genética puede generar efectos inesperados en animales, como malformaciones, problemas metabólicos o menor esperanza de vida, planteando cuestiones éticas sobre su uso.

4.  Incertidumbre sobre efectos a largo plazo en la salud: Aunque los cultivos transgénicos aprobados no han mostrado riesgos mayores que los alimentos convencionales, persiste el debate sobre posibles efectos a largo plazo, incluyendo alergias o respuestas inmunológicas inesperadas.

5.  Debate ético, legal y percepción pública: Existen debates éticos sobre la manipulación genética de organismos vivos, así como preocupaciones de consumidores respecto a etiquetado, derechos alimentarios y transparencia regulatoria, lo que puede dificultar la aceptación social de estas tecnologías.

Video obtenido de: https://www.youtube.com/watch?v=ArZOjYvI5-0

Referencias Bibliográficas:

1. Benedetto R, Centeio R, Ousingsawat J, et al. Transport properties in CFTR−/− knockout piglets suggest normal airway surface liquid pH and enhanced amiloride-sensitive Na⁺ absorption. Pflugers Arch - Eur J Physiol [Internet] 2020 [consultado 22 Feb 2026];472:1507–1519. Disponible en: https://doi.org/10.1007/s00424-020-02440-y

2. Kole C, Pandey S, Yasin JK, Mamidi S, Bohra A, Bhattacharya P, et al. Benefits, concerns, and sustainable alternatives to genetically modified crops from a global and Indian perspective. Plant Genome [Internet] 2025 [consultado 22 Feb 2026];18(4):e70154. Disponible en: https://doi.org/10.1002/tpg2.70154

3. Naveen AK, Sontakke M. A review on regulatory aspects, challenges and public perception in acceptance of genetically modified foods. Food Sci Biotechnol [Internet] 2024 [consultado 22 Feb 2026];33(4):791–804. Disponible en: https://doi.org/10.1007/s10068-023-01481-0

Ejemplo de ADN recombinante artificial en la enfermedad de Pompe y ejemplo de Ácidos Nucleicos recombinantes en la naturaleza (sin que haya intervenido la manipulación humana)

 ADN recombinante artificial en la enfermedad de Pompe

Tema: Producción de ácido α-glucosidasa humana recombinante (GAA) en cultivo celular vegetal de Arabidopsis thaliana alg3 con modificación dirigida de glicosilación para aplicación en la enfermedad de Pompe.

Objetivo: Desarrollar una fuente alternativa de GAA recombinante con un perfil de N-glicosilación enriquecido en estructuras tipo paucimannosa, las cuales favorecen la captación celular mediada por receptores de manosa en los lisosomas. Esto permite optimizar la eficacia de la terapia de reemplazo enzimático en pacientes con enfermedad de Pompe, mejorando la internalización celular y contribuyendo a la reducción de costos de producción frente a sistemas de expresión en células de mamífero.

Gen o secuencia a clonar: Se clonó la secuencia codificante completa del gen humano GAA (NM_000152), que codifica la enzima lisosomal ácido α-glucosidasa responsable de la degradación del glucógeno acumulado en la enfermedad de Pompe.

Enzimas de restricción: La construcción del ADN recombinante se realizó utilizando la enzima de restricción SpeI, generando extremos cohesivos compatibles tanto en el inserto como en el vector de expresión vegetal.

Enzima Ligasa: La ligación del fragmento génico al vector se efectuó utilizando T4 DNA ligasa (Ligation High Ver.2.0), permitiendo la formación de enlaces fosfodiéster estables entre el inserto y el plásmido.

Vector: Se utilizó el vector binario pFK1-BAR-GAA, diseñado para expresión en células vegetales y que contiene el gen BAR como marcador de resistencia a fosfinotricina para la selección de transformantes.

Célula Receptora: La célula receptora fue una línea de suspensión celular de Arabidopsis thaliana mutante alg3, deficiente en el procesamiento temprano de N-glicanos, lo que favorece la acumulación de glicanos ricos en manosa (paucimannosa).

Mecanismo de transferencia o inserción del gen:  

1.      Se amplifica el cDNA humano del gen GAA por PCR, incorporando sitios de restricción SpeI en sus extremos.

2.      El producto de PCR y el vector pFK1-BAR se digieren con SpeI para generar extremos compatibles.

3.      El fragmento GAA se inserta al vector linealizado mediante ligación (Ligation High Ver. 2.0), formando el plásmido recombinante pFK1-BAR-GAA.

4.      El plásmido se introduce en Agrobacterium tumefaciens LBA4404 por electroporación.

5.      La bacteria transformada se co-cultiva con células o callos de Arabidopsis alg3.

6.      La región T-DNA que contiene el gen GAA se transfiere al núcleo de la célula vegetal.

7.      El T-DNA se integra de forma estable en el genoma nuclear.

8.      Las células transformadas se seleccionan por resistencia a bialaphos.

9.      Las líneas positivas se expanden en cultivo líquido para producir GAA recombinante.

Métodos de identificación de clones:  Los clones transformados fueron seleccionados inicialmente en el medio de cultivo con fosfinotricina gracias al marcador BAR presente en el vector. También, la presencia del gen GAA se confirmó mediante PCR específica para el inserto. La integración estable en el genoma vegetal se verificó mediante análisis molecular adicional. La expresión de la proteína recombinante se evaluó mediante Western blot utilizando anticuerpos anti-GAA. La funcionalidad enzimática se determinó mediante ensayos de actividad α-glucosidasa, y el perfil de N-glicosilación fue analizado para confirmar la presencia predominante de estructuras tipo paucimannosa.

Confirmación de la producción de alfa glucosidasa ácida (GAA) en el cultivo de células alg3 de Arabidopsis transformadas.

Imagen obtenida de: https://www.frontiersin.org/journals/plant-science/articles/10.3389/fpls.2021.703020/full

Video obtenido de: https://www.youtube.com/watch?v=mto9rV5JOU0 

Referencias Bibliográficas:

1. Sariyatun R, Florence, Kajiura H, Ohashi T, Misaki R, Fujiyama K. Production of Human Acid-Alpha Glucosidase With a Paucimannose Structure by Glycoengineered Arabidopsis Cell Culture. Front Plant Sci [Internet]. 2021 [consultado 15 feb 2026];12:703020. Disponible en: https://doi.org/10.3389/fpls.2021.703020

Ácidos Nucleicos recombinantes en la naturaleza

La generación de ácidos nucleicos recombinantes en la naturaleza se evidencia en el Virus de la Inmunodeficiencia Humana tipo 1 (HIV-1), donde la recombinación genética ocurre de manera espontánea durante la replicación viral en células coinfectadas por distintos subtipos. Esto sucede debido a que la transcriptasa inversa puede alternar entre dos genomas virales diferentes mientras sintetiza ADN a partir del ARN, fenómeno conocido como “salto de plantilla”. Esto produce que se forme un ADN proviral híbrido con estructura en mosaico, compuesto por segmentos genéticos de distintos orígenes.

Estos genomas recombinantes dan lugar a formas recombinantes circulantes (CRFs), que se presentan de manera natural en poblaciones humanas. Este mecanismo contribuye significativamente a la diversidad genética, evolución y capacidad de adaptación del virus. Estudios genómicos recientes han confirmado esta dinámica al identificar nuevos CRFs y diversos patrones de recombinación entre subtipos en múltiples regiones del mundo.

Imagen obtenida de: https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC11421422/

Referencias Bibliográficas:

1. Oliveira RC, Martin D, de Souza JSM, Alcântara LCJ, Guimarães ML, Brites C, et al. Description of the new HIV-1 intersubtype B/C circulating recombinant form (CRF146_BC) detected in Brazil. Mem Inst Oswaldo Cruz [Internet]. 2024 [consultado 15 feb 2026];119:e230214. Disponible en: https://doi.org/10.1590/0074-02760230214

Técnica de secuenciación para el Virus del papiloma humano (VPH)

 La secuenciación de próxima generación (NGS) es una prueba molecular utilizada para la detección y genotipado del Virus del Papiloma Humano (VPH), un virus de ADN de doble hebra con más de 200 genotipos, algunos de alto riesgo oncogénico asociados al cáncer cervicouterino y a otros cánceres anogenitales y orofaríngeos. La identificación del genotipo de VPH es clave para evaluar el riesgo de progresión, apoyar el seguimiento epidemiológico y orientar decisiones clínicas.

La NGS permite identificar múltiples genotipos de VPH en una sola corrida, incluso en coinfecciones y en muestras de tejidos fijados en parafina. El procedimiento incluye la extracción de ADN, amplificación por PCR de regiones específicas, preparación de librerías, secuenciación masiva paralela y análisis bioinformático mediante comparación con bases de datos de referencia.

Los paneles dirigidos de NGS analizan regiones clave del genoma viral, principalmente los genes E6 y E7, oncogenes que inactivan los supresores tumorales p53 y Rb; el gen E2, cuya alteración se asocia con integración viral y mayor riesgo oncogénico; y el gen L1, útil para la identificación genotípica. Este enfoque permite detectar genotipos de alto riesgo como VPH 16 y 18, así como genotipos de bajo riesgo clínicamente relevantes, contribuyendo al diagnóstico y vigilancia del VPH.

Video obtenido de: https://www.youtube.com/watch?v=SiEA65G5ErY  

Referencias Bibliográficas:

1. Andersen K, Holm K, Tranberg M, Pedersen CL, Bønløkke S, Steiniche T, et al. Targeted Next Generation Sequencing for Human Papillomavirus Genotyping in Cervical Liquid-Based Cytology Samples. Cancers (Basel) [Internet]. 2022 [consultado 17 ene 2026];14(3):652. Disponible en: https://doi.org/10.3390/cancers14030652

2. Ambulos NP Jr, Schumaker LM, Mathias TJ, White R, Troyer J, Wells D, et al. Next-Generation Sequencing-Based HPV Genotyping Assay Validated in Formalin-Fixed, Paraffin-Embedded Oropharyngeal and Cervical Cancer Specimens. J Biomol Tech [Internet]. 2020 [consultado 17 ene 2026];27(2):46–52. Disponible en: https://doi.org/10.7171/jbt.16-2702-004

Una prueba PCR (Reacción en Cadena de la Polimerasa) para la detección de Toxoplasma gondii

El Toxoplasma gondii es un parásito intracelular obligado, capaz de causar toxoplasmosis congénita, ocular y enfermedad grave en pacientes inmunocomprometidos. La PCR para Toxoplasma gondii permite la detección directa de su ADN en muestras clínicas, lo que es útil en fases agudas de la infección o cuando la respuesta serológica es insuficiente, proporcionando un diagnóstico temprano, específico y de alta sensibilidad.

Tipo de muestra/s biológicas:

Se utiliza principalmente líquido amniótico (especialmente para el diagnóstico prenatal), sangre (total, suero o plasma) o líquido cefalorraquídeo. También se utilizan muestras fetales y tejidos en infecciones congénitas o en pacientes inmunocomprometidos.

Extracción del ácido nucleico:

El ADN se extrae mediante kits comerciales basados en columnas de sílice o perlas magnéticas, tanto en fluidos como en tejidos. En el caso de los tejidos, incluidos los fijados o incluidos en parafina, se inicia con un proceso de lisis (usualmente con la proteinasa K e incubación prolongada), seguido de purificación mediante kits comerciales o métodos de precipitación. 

Tipo de PCR y los genes amplificados:

En el ámbito clínico se emplean PCR convencionales y PCR anidadas (Nested PCR), principalmente con fines cualitativos, y de forma preferente PCR en tiempo real (qPCR), para detección y cuantificación. Los blancos moleculares más utilizados son el gen multicopia B1 (≈35 copias por genoma) y el elemento repetitivo de 529 pb (Rep-529 / AF146527), que presenta aproximadamente 200–300 copias. Debido a su mayor número de copias, Rep-529 suele ofrecer una mayor sensibilidad analítica y es la diana más utilizada en qPCR, aunque algunos protocolos emplean ambos blancos de forma combinada junto con controles internos.

Tipo de resultados cualitativos o cuantitativos:

Resultados cualitativos: Las PCR convencionales y anidadas proporcionan resultados cualitativos reportando positivo negativo.

Resultados cuantitativos: La qPCR también permite obtener resultados cuantitativos, expresados como valores Ct (ciclo umbral) y, cuando se dispone de curvas estándar, estimación de carga parasitaria. Estos resultados son útiles en muestras como líquido amniótico, para evaluar la carga parasitaria, y para el seguimiento clínico. Los ensayos qPCR han demostrado amplios rangos lineales y límites de detección muy bajos, por lo que en la práctica clínica se utilizan tanto con fines confirmatorios (cualitativos) como para estimación y monitoreo de la carga parasitaria.

Video obtenido de: https://www.youtube.com/watch?v=iu4s3Hbc_bw

Referencias Bibliográficas:

1. Fadel EF, El-Hady HA, Ahmed AM, Tolba MEM. Molecular diagnosis of human toxoplasmosis: the state of the art. J Parasit Dis [Internet]. 2024 [consultado 2026 Ene 10]; 48(2):201–216. Disponible en: https://doi.org/10.1007/s12639-024-01667-1

2. Kasper DC, Sadeghi K, Prusa AR, Reischer GH, Kratochwill K, Förster-Waldl E, et al. Quantitative real-time polymerase chain reaction for the accurate detection of Toxoplasma gondii in amniotic fluid. Diagn Microbiol Infect Dis [Internet]. 2021 [consultado 2026 Ene 10]; 63(1):10–15. Disponible en: https://doi.org/10.1016/j.diagmicrobio.2008.09.009

Alteración de la Epigenética en la enfermedad de Alzheimer

En la enfermedad de Alzheimer se han identificado alteraciones epigenéticas, principalmente hipermetilación del ADN en regiones CpG del gen ANK1 y metilación diferencial en genes de susceptibilidad genética como BIN1, RHBDF2 y ABCA7. Estos cambios se han detectado en tejido cortical, donde se correlacionan con placas amiloides y ovillos neurofibrilares característicos de la enfermedad. La metilación anómala modula la expresión génica, afectando vías relacionadas con inflamación, citoarquitectura y tráfico endosomal. Además, la ANK1 muestra cambios de expresión en la microglía, lo que sugiere un papel en la respuesta inmune cerebral. Esto nos indica que la alteración epigenética participa tempranamente en la fisiopatología del Alzheimer y podría servir como biomarcador o diana terapéutica.

Imagen obtenida de: https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC4410018/

Imagen obtenida de: https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC4292795/

Referencias Bibliográficas:

1. Lunnon K, Smith RG, Hannon E, De Jager PL, Srivastava G, Volta M, et al. Cross-tissue methylomic profiling strongly implicates a role for cortex-specific deregulation of ANK1 in Alzheimer’s disease neuropathology. Nat Neurosci [Internet]. 2021 [consultado 13 Dic 2025];17(9):1164–1170. Disponible en: https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC4410018/

2. De Jager PL, Srivastava G, Lunnon K, Burgess J, Schalkwyk LC, Yu L, et al. Alzheimer’s disease: early alterations in brain DNA methylation at ANK1, BIN1, RHBDF2 and other loci. Nat Neurosci [Internet]. 2020 [consultado 13 Dic 2025];17(9):1156–1163. Disponible en: https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC4292795/